葉綠素測定儀是用來測量葉綠素含量的儀器,葉綠素測定儀測量時間快速,LCD直接顯示葉綠素值,30個數(shù)據(jù),自動計算并顯示平均值。葉綠素測定儀可以即時測量植物的葉綠素相對含量(單位SPAD)或‘綠色程度',從而可以了解植物真實的硝基需求量并且?guī)椭私馔寥老趸娜狈Τ潭然蚴欠襁^多地施加了氮肥。
儀器原理
根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收,利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度,即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律,某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。當(dāng)溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,α為該物質(zhì)的吸光系數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì),則此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。今欲測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,只需測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A,并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測定葉綠素a、b時為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的大吸收峰。
實驗準(zhǔn)備
(一)材料:新鮮(或烘干)的植物葉片。
?。ǘ﹥x器設(shè)備:1. 分光光度計;2. 電子頂載天平(感量0.01g);3. 研缽;4. 棕色容量瓶;5. 小漏斗;6. 定量濾紙;7. 吸水紙;8. 擦境紙;9. 滴管。
(三)試劑:96%乙醇(或80%丙酮);石英砂;碳酸鈣粉。